熙和每日一讲1116

第九章 尿液化学检查

尿液酸碱度测定   (一)定义是反映肾脏调节机体内环境体液酸碱平衡能力的重要指标之一,通常简称为尿液酸度。   (二)检测方法及评价1.试带法   是目前最广泛应用的筛检方法。目前采用甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH6.0~7.6)适量配合制成pH试带垫片,能反映尿液pH5.0~9.0的变异范围,基本可以满足临床对尿pH检查需要。2.指示剂法   在洁净玻片上或试管内放入尿液少许,加溴麝香草酚蓝(BTB)溶液1滴,观察结果,显示黄色为酸性尿;显示蓝色为碱性尿;显示绿色为中性尿。BTB的pH变色范围为6.0~7.6;当尿液pH偏离范围时,检测结果不准确。本法受黄疸尿、血尿干扰。

3.滴定法通常用0.1mol/L的标准氢氧化钠溶液,将一定量尿液标本滴定至pH7.4时,根据NaOH消耗的用量求得尿液可滴定酸度。本法可检查尿酸度总量,用于尿酸度的动态监测,但操作复杂。4.pH计法用pH电极能直接精确地测定出尿液的pH值。本法精确度较高,但需要特殊仪器,且操作更烦琐。   标本必须新鲜陈旧标本可因尿CO2挥发或细菌生长使pH增高,或因细菌和酵母菌作用,使尿中葡萄糖降解为酸和乙醇而pH减低。

  (三)参考值   在正常饮食条件下,晨尿多偏弱酸性,多数尿标本pH5.5~6.5,平均pH6.0。随机尿pH4.6~8.0。

(四)临床应用1.生理性变化   (1)尿液pH易受食物影响:如进食含蛋白质高的食物过多或饥饿状态等,尿pH减低;而进食过多的蔬菜、水果等含碱性物质较多的食品时,尿pH增高。

(2)进餐后尿pH增高:机体每次进餐后,尿液的pH呈一过性增高,称之为碱潮。   (3)剧烈运动、饥饿、出汗、应激状态等生理活动,夜间入睡后呼吸减慢,体内酸性代谢产物增多均可使尿液pH减低。许多药物也会影响尿液pH。尿内含有大量脓、血或细菌污染,分解尿素可使尿液碱化。

2.病理性变化   (1)尿pH减低   见于酸中毒、慢性肾小球肾炎、发热、糖尿病、痛风、低血钾性碱中毒、白血病等。   (2)尿pH增高:见于呼吸性碱中毒、严重呕吐、尿路感染、肾小管性酸中毒、应用利尿剂等。

尿液蛋白质检查   (一)蛋白尿定义   尿液中蛋白质超过mg/24h或超过mg/L时,蛋白定性试验呈阳性,即称为蛋白尿。

(二)检测方法及评价1.尿蛋白定性试验为蛋白尿的过筛试验。   (1)试带法:利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感,对球蛋白的敏感性仅为清蛋白1/~1/50,且可漏检本周蛋白。尿液pH值增高也可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化,适于健康普查或临床筛检。   (2)加热乙酸法:为传统的经典方法。加热煮沸使蛋白变性、凝固,然后加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点(pH4.7),在含有适量无机盐状况下,蛋白质更易于变性下沉,同时可消除某些磷酸盐(如无定形磷酸盐、铵镁磷酸盐等)在碱性条件下易析出结晶、造成混浊的干扰。   加热—加酸—再加热①在试管内加清晰尿液至管高2/3处,浑浊尿液标本应离心取上清液再试验。②用木夹夹持(或手持)试管下1/3处,加热煮沸试管上1/3处内的尿液。③将试管上部加热处尿液与试管下部未加热尿液比较,观察有无浑浊变化。④在试管中加入5%冰乙酸2滴,再煮沸尿液,立即观察结果,结果的判断及报告形式同磺基水杨酸法。

  (3)磺基水杨酸法:又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快,与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应;敏感度达0.05g/L,因而有一定的假阳性。被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法,并推荐为检查尿蛋白的确证试验。根据反应的混浊程度,作出尿蛋白的定性或半定量判断:   阴性(-,不显浑浊,尿液外观仍清晰透明)   微量(±,轻微浑浊,隐约可见)   阳性(+,明显白色浑浊,但无颗粒出现)   阳性(++,稀薄乳样浑浊,出现颗粒)   阳性(+++,乳浊样,有絮片状沉淀)   阳性(++++,絮状浑浊,有大凝块下沉)

2.尿蛋白定量试验:沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。   比色法:常用双缩脲比色法,为蛋白质定量测定经典方法。本法显色稳定,对清蛋白、球蛋白的反应都有同样的灵敏度,但灵敏度低。   染料结合法:方法有考马斯亮蓝法、丽春红S法等。考马斯亮蓝染料易沉着在比色杯上,应注意洗脱。

  (三)质量控制1.试带法   必须使用标准合格的试带,并严格按照注意事项操作。2.加热乙酸法   控制加酸量及盐类浓度,加酸过少、过多,导致远离蛋白质等电点时,可使阳性程度减弱。如尿液盐类浓度过低,又可致假阴性,此时可加饱和氯化钠溶液1~2滴后,再进行检查。3.磺基水杨酸法   使用某些药物(如青霉素钾盐、复方新诺明、对氨基水杨酸等)及有机碘造影剂时,以及尿内含有高浓度尿酸、草酸盐或黏蛋白时,可呈假阳性反应。此时,可通过加热煮沸后浊度是否消失予以鉴别。4.考马斯亮蓝法   尿蛋白测定应注意:①考马斯亮蓝试剂易吸附在比色杯上,每次使用后应立即用甲醇或乙醇或水加适量丙酮洗涤,并最好用专用比色杯。②试剂酸度对蛋白质测定影响较大,pH越高灵敏度越低。③考马斯亮蓝试剂必须新鲜,否则对蛋白质结合能力下降。④线性范围较窄。

  (四)参考值   定性试验:阴性。   定量试验:<0.1g/L;或<0.15g/24h。   (五)临床应用

1.生理性蛋白尿   一般尿蛋白定性试验不超过(+),定量<0.5g/24h。   (1)功能性蛋白尿:见于剧烈运动后,发热、寒冷刺激、精神紧张、过度兴奋等,呈混合性蛋白尿,一般为2~3d后消退。   (2)直立性蛋白尿:又称为体位性蛋白尿。   可见于站立时间过长、“行军性”蛋白尿等,多见于青少年,绝大多数无肾病证据。   (3)其他生理性蛋白尿:如摄入性蛋白尿、偶然性蛋白尿、老年性蛋白尿、妊娠性蛋白尿等。   见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、浆细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿、挤压伤综合征、电灼伤、多发性肌炎,进行性肌肉萎缩、急性单核细胞白血病尿溶菌酶增高,胰腺炎严重时尿淀粉酶增高等。

2.病理性蛋白尿   (1)肾前性蛋白尿(溢出性蛋白尿)   见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、浆细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿、挤压伤综合征、电灼伤、多发性肌炎,进行性肌肉萎缩、急性单核细胞白血病尿溶菌酶增高,胰腺炎严重时尿淀粉酶增高等。

(2)肾性蛋白尿1)肾小球性蛋白尿:肾病综合征:蛋白尿以清蛋白为主,及少量相对分子质量小的蛋白质,定性试验多数为3+~4+,定量试验常为3.5~10g/d,最多可达20g/d。原发性肾小球肾炎:如急性肾炎、慢性肾炎、膜性肾炎、膜增生性肾炎、肾功能衰竭等。   继发性肾小球疾病:如糖尿病肾病、狼疮性肾炎、妊娠中毒症等。2)肾小管性蛋白尿:可见于肾小管间质病变、重金属中毒、药物中毒、器官移植等。   (3)肾后性蛋白尿:可见于泌尿、生殖系炎症反应;泌尿系结石、结核、肿瘤;泌尿系邻近器官疾病等。

尿液糖检查   (一)定义   正常人尿液几乎不含或仅含微量葡萄糖,一般尿糖定性试验为阴性。当血糖浓度超过肾糖阈(>8.88mmol/L)或肾小管重吸收能力下降时,尿糖定性试验呈阳性,称为糖尿。   (二)检测方法及评价1.试带法用葡萄糖氧化酶法。大多数试带法不与乳糖、半乳糖、果糖及还原物质发生反应。本法检测葡萄糖的特异性强、灵敏度高、简便快速,适用于自动化分析。2.薄层层析法操作复杂、费时、成本高,多用于基础研究,临床上一般情况少用。3.班氏法(Benedict法)利用葡萄糖的还原性而设计,是传统尿糖定性试验的方法。   取班氏试剂1ml于试管中,加热煮沸,若不变色,则可加入尿液(0.1ml),再煮沸1~2min,冷却后观察结果。   班氏法是非特异性测定葡萄糖的试验,可检出多种尿糖,如乳糖、果糖、戊糖等。本法简便,但易受其他还原物质干扰。

  (三)质量控制1.容器清洁不含氧化性物质如漂白粉、次亚氯酸等,否则易导致班氏法假阴性而试带法假阳性。2.及时送检尿液必须新鲜,若长时间放置,细菌繁殖等可造成假阴性结果。3.排除维生素C干扰维生素C可使班氏法呈假阳性,使试带法呈假阴性。4.高比密尿及高酮体尿可使试带法糖定性呈假阴性。5.班氏试验必须首先煮沸班氏试剂,避免试剂变质。①糖尿病;②摄入性糖尿;③应激性糖尿;④其他内分泌异常如甲状腺功能亢进、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤、库欣综合征等。

  (四)参考值定性试验:阴性。   (五)临床意义糖尿-葡萄糖尿1.血糖增高性糖尿   见于:①糖尿病;②摄入性糖尿;③应激性糖尿;④其他内分泌异常如甲状腺功能亢进、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤、库欣综合征等。2.血糖正常性糖尿:又称肾性糖尿,出现糖尿的原因是由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力减低,肾糖阈减低所致的糖尿。①家族性肾性糖尿;②新生儿糖尿;③后天获得性肾性糖尿;④妊娠期或哺乳期妇女。

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