无机磷检测试剂盒（紫外分光光度微板法）
产品货号：BA
产品规格：T
产品简介：
血清中的无机磷(Inorganicphosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-两种磷酸根阴离子组成，上述阴离子在不同的pH环境下能快速相互转换。在pH7.4血清中，二者浓度比例为1:4；在酸中毒环境下二者浓度约为1:1；在碱中毒环境下二者浓度比例为1:9；在pH4.5尿液中浓度比例为:1。WHO推荐的常规检测方法为比色法，我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法，亦可采用紫外分光光度法。
无机磷检测试剂盒(紫外分光光度微板法)无需处理样本，利用无机磷与钼酸铵结合生成磷钼酸铵，通过酶标仪直接检测～nm处吸光度，根据公式计算出无机磷含量。紫外分光光度法优点在于：操作简单、快速、稳定；缺点在于：易受溶血、黄疸、脂血的干扰。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
需自备的仪器和用品：
离心管或试管、离心机、比色杯、分光光度计。
操作步骤（仅供参考）：
1.(选做)制备样品：
① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Pi的检测。
② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。
③ 高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Pi，可以使用ddH2O稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
④ (选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Pi含量。
2.制备磷标准工作液：取适量的磷标准(1mg/ml)，按磷标准(1mg/ml)：磷标准稀释液=1:24的比例稀释，即获得磷标准(1.mmol/L)。4℃保存，用于Pi的检测。
3.制备Pi显色工作液：取适量的PiAssaybuffer和钼酸铵显色液，等量混合，24h内使用。
4.Pi检测：按下表操作。
5.混匀，室温静置5min，酶标仪nm处检测，以空白管调零，读取各管吸光度值。一般应2h内检测完毕。
计算:
血清、血浆中无机磷计算公式：磷(mmol/L)=(A测定/A标准)×1.
尿液中无机磷计算公式：磷(mmol/d)=(A测定/A标准)×1.×N×24h尿量(L)
组织中磷计算公式：磷(mmol/mg)=(A测定/A标准)×1./待测样品蛋白浓度(mg/L)
式中：A测定=待测管的吸光度值
A标准=标准管的吸光度值
N=尿液稀释倍数
单位换算：mg/dl=mmol/L/0.
参考区间:健康成年人血清磷浓度：0.9～1.34mmol/L(2.76～4.16mg/dl)
注意事项:
1.本法应在5min～2h内检测。3h后标准管吸光度无变化，测定管吸光度随着时间的延长而上升。
2.溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。
3.黄疸和脂血样本应做标本空白。
4.本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。
5.如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。
6.本法线性范围为0.33～3.88mmol/L。
有效期：12个月有效。